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技術(shù)文章首頁(yè) > 技術(shù)文章 羅氏蛋白酶磷酸酶抑制劑在許多試驗(yàn)中發(fā)決定性作用
  • 羅氏蛋白酶磷酸酶抑制劑在許多試驗(yàn)中發(fā)決定性作用
  • 點(diǎn)擊次數(shù):2266 更新時(shí)間:2016-12-09
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  • 羅氏蛋白酶磷酸酶抑制劑是指能抑制蛋白水解酶的活性而發(fā)揮抗休克作用的藥物。蛋白水解是休克的一個(gè)重要病理現(xiàn)象,也是休克過(guò)程中細(xì)胞廣泛損傷的一個(gè)可能機(jī)理,并與休克致死有關(guān)。據(jù)此提出蛋白酶抑制劑用于防治休克的發(fā)生和發(fā)展可能有益。
     
    羅氏蛋白酶磷酸酶抑制劑功能 :
    涉及到許多細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外的過(guò)程:
    1) 食物蛋白在消化道的消化
    2) 激活無(wú)活性酶原和多肽激素/神經(jīng)轉(zhuǎn)移介質(zhì)的釋放
    3) 調(diào)節(jié)血凝物質(zhì)和纖維素
    4) 內(nèi)源性和外源性蛋白的細(xì)胞內(nèi)消化
    5) 跨膜的蛋白轉(zhuǎn)移
    6) 微生物對(duì)生物體攻擊,通過(guò)釋放蛋白酶的導(dǎo)致毒性增加
     
    當(dāng)細(xì)胞破碎的時(shí)候,蛋白水解酶就會(huì)被釋放出來(lái)或被激活,使電泳結(jié)果復(fù)雜化,影響zui終結(jié)果分析。為了避免這些情況的出現(xiàn),建議在樣品制備時(shí)盡可能在低溫下進(jìn)行。此外,許多蛋白酶在pH9以上就失活了,因此Tris堿,碳酸鈉或堿性載體兩性電解質(zhì)往往能抑制蛋白水解。但是有些蛋白酶在上述條件下仍然保持著活性,此時(shí)應(yīng)當(dāng)使用蛋白酶抑制劑。因此對(duì)于我們想要研究的蛋白來(lái)說(shuō),選擇性和有效的抑制這些蛋白酶對(duì)于蛋白純化路線(xiàn)設(shè)計(jì)來(lái)說(shuō)顯得尤為重要。
     
    但是這樣配置溶液進(jìn)行處理,有時(shí)也是頗為麻煩,而且效果可能并不好,目前有一些廠(chǎng)家試劑在簡(jiǎn)便操作,和抑制效果方面有不俗的表現(xiàn),可以考慮在實(shí)驗(yàn)中選用,節(jié)約時(shí)間和便于結(jié)果分析。
     
    羅氏蛋白酶磷酸酶抑制劑混合片也許就能滿(mǎn)足這種需要,這種試劑能抑制很多種不同的蛋白酶,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶及金屬蛋白酶等,而且可應(yīng)用于差不多所有的組織或細(xì)胞提物,包括來(lái)自動(dòng)物、植物、酵母、細(xì)菌和直菌的樣品。
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